DAB顯色試劑盒（20×）說(shuō)明書(shū)

   DAB Kit（20×）

   DAB顯色試劑盒（20×）

   目錄號(hào)：K0125

   保存條件：2-8℃保存。

   組分說(shuō)明

                    Cat. No.                            K0125        K0125A

                    Kit Size                              20 ml         60 ml

                    DAB-試劑  A（20×）    1 ml           3 ml

                    DAB-試劑  B（1×）      20 ml         60 ml

   產(chǎn)品簡(jiǎn)介

    DAB（3,3′N-Diaminobenzidine Tertrahydrochloride）是辣根過(guò)氧化物酶（HRP）

的常用底物，在辣根過(guò)氧化物酶的催化下，DAB會(huì)產(chǎn)生不溶于水和乙醇的棕色沉淀。

該試劑盒適用于HRP系統(tǒng)的的免疫組化中的組織切片、細(xì)胞爬片以及Western  Blot中

PVDF膜、NC膜等的染色。辣根過(guò)氧化物酶可以催化底物DAB在目的蛋白所在的位置

轉(zhuǎn)變?yōu)楹稚幕衔铮筛鶕?jù)顏色反應(yīng)來(lái)確定目的蛋白的位置及表達(dá)情況。

    注意事項(xiàng)

 1．工作液現(xiàn)配現(xiàn)用，配制好的工作液2-8°C避光1小時(shí)內(nèi)有效。

 2．工作液用量必需充足，保證*覆蓋組織片或印跡膜。

 3．顯色后的組織切片或細(xì)胞爬片可用蘇木精或甲基綠復(fù)染。

 4．對(duì)于組織切片，以每張切片用50 µl顯色工作液計(jì)算，1  ml  20×DAB為400張切片的用量，3 ml為1200張切片的用量。

    5．為獲得Z佳實(shí)驗(yàn)結(jié)果，請(qǐng)務(wù)必優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件。

 6．顯色后若背景太深，可以考慮延長(zhǎng)封閉時(shí)間，避免非特異性染色，或者縮短  DAB的

    顯色時(shí)間；顯色后若顯色太弱或沒(méi)有顯色，可以考慮增加一抗或二抗的濃度，或者

    適當(dāng)延長(zhǎng)顯色時(shí)間。

    7．DAB為可疑致癌物，使用時(shí)請(qǐng)采取必要的防護(hù)措施。

    8．本產(chǎn)品僅用于科研，不能用于人體反應(yīng)或人體治療。

    使用方法

1．DAB顯色工作液配制：根據(jù)需要量，將試劑A和試劑B以1：19的體積比混勻后即為

    DAB顯色工作液。也可選擇每毫升試劑B中滴加1滴（約50 µl）試劑A，混勻即可。

2．顯色：1）印跡膜顯色：將配制好的工作液滴加在印跡膜上（或?qū)⒂≯E膜傾入到DAB

    工作液中）即可顯色。顯色時(shí)間一般為  1-5分鐘。顯色完畢后，將膜浸入水中，終

    止反應(yīng)。

     2）組織切片或細(xì)胞爬片顯色：加適量的  DAB顯色工作液于需要顯色的組織切片或

     細(xì)胞爬片上即可顯色，顯色時(shí)間一般為  1-5分鐘。顯微鏡下觀察控制顯色時(shí)間，當(dāng)

     達(dá)到最佳顯色效果后，自來(lái)水沖洗終止顯色。顯色后的切片經(jīng)復(fù)染、脫水透明，封

     片后可長(zhǎng)期保存。

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