檸檬酸緩沖液（IHC抗原修復(fù)液，100×)說明書

     CitrateBuffer（100×）

     檸檬酸緩沖液（IHC抗原修復(fù)液，100×)

     

     Cat.No.K0128

     保存：2-8℃

     組分說明

                           Cat.No.        K0128

                           Volume         100ml

     產(chǎn)品簡介

     福爾馬林固定時，組織中的許多氨基酸殘基形成醛鍵、羧甲鍵而封閉了部分抗原決定簇，同時蛋白之間發(fā)生交聯(lián)也使抗原決定簇隱蔽。因此，對于石蠟切片，要求在進(jìn)行 IHC染色前，先進(jìn)行抗原修復(fù)，即將固定時分子之間所形成的交聯(lián)破壞，恢復(fù)抗原的原有空間形態(tài)。本抗原修復(fù)液適合于大多數(shù)的抗原，用該修復(fù)液修復(fù)后陽性染色明顯增強(qiáng)，抗原定位理想。

     注意事項(xiàng)

     1.   請使用足量的修復(fù)液，修復(fù)過程中保證組織切片*浸沒在修復(fù)液中。

     2.   使用沸水浴或高壓修復(fù)時，操作請務(wù)必謹(jǐn)慎，尤其高壓修復(fù)時，保證鍋內(nèi)有足量的修復(fù)液，以防止干燒。

     3.   推薦的修復(fù)時間為達(dá)到理想修復(fù)效果所需時間，如組織粘片不牢，容易掉片，請酌情減少修復(fù)時間。

     使用方法

     1.高壓熱修復(fù)：根據(jù)需要量，取適量本品，稀釋100倍后即可使用（終濃度為0.01mol/L）。將稀釋好的修復(fù)液加入高壓鍋內(nèi)，將待修復(fù)切片浸于其中，保證修復(fù)液沒過組織（最好將切片浸入盛修復(fù)液的塑料容器內(nèi)，再置于鍋內(nèi)修復(fù)液浴中），蓋上壓力鍋蓋，加熱至均勻噴汽，從噴汽開始計(jì)時，1~2分鐘后壓力鍋離開熱源，自然冷卻至室溫，取出切片，蒸餾水沖洗后，再用PBS（0.01MpH7.4）漂洗2次，每次3分鐘。下接免疫組化染色步驟。此方法修復(fù)強(qiáng)度最大，是

     2Z常用的熱修復(fù)法。

     微波熱修復(fù)：根據(jù)需要量，取適量本品，稀釋100倍后即可使用（終濃度為0.01mol/L）。將切片放入盛有修復(fù)液的容器中，置微波爐內(nèi)加熱至沸騰，停止加熱，使容器內(nèi)液體溫度下降保持在95℃~98℃之間并持續(xù)10~15分鐘（注意：請根據(jù)具體機(jī)型酌情設(shè)置條件，務(wù)必滿足以上步驟中對溫度和時間的要求）。取出容器，自然冷卻至室溫，取出切片，蒸餾水沖洗后，再用PBS（0.01MpH7.4）漂洗2次，每次3分鐘。下接免疫組化染色步驟。此方法修復(fù)強(qiáng)度大于沸水浴，但小于高壓修復(fù)。

3. 沸水浴熱修復(fù)：根據(jù)需要量，取適量本品，稀釋100倍后即可使用（終濃度為0.01mol/L）。將待修復(fù)切片*浸入盛有修復(fù)液的容器中，并將此容器置于盛去離子水的大器皿水浴中，電爐上加熱煮沸，從修復(fù)液的溫度到達(dá)95℃起開始計(jì)時15~20分鐘。讓切片在修復(fù)液中自然冷卻至室溫，蒸餾水沖洗，再用PBS（0.01MpH7.4）漂洗2次，每次 3分鐘。下接免疫組化染色步驟。該方法效果較微波和高壓修復(fù)差。

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